Tomusky ylmy gollanma: 40°C ýylylyk tolkuny molekulýar tejribeler bilen duşuşanda

Soňky döwürde Hytaýyň köp böleginde ýokary temperatura dowam edýär. 24-nji iýulda Şandun welaýat meteorologiýa gözegçisi sary reňkli ýokary temperatura duýduryşyny yglan etdi we içerki sebitlerde indiki dört günüň dowamynda "sauna ýaly" temperaturanyň 35-37°C (111-133°F) we 80% çyglylyk boljakdygyny çaklady. Sinszýan, Turpan ýaly ýerlerde temperatura 48°C (111-133°F) golaýlaýar. Hubeýiň Uhan we Sýaogan şäherlerinde mämişi reňkli duýduryş berilýär, käbir sebitlerde temperatura 37°C-den geçýär. Bu gyzgyn yssyda pipetkalaryň ýüzüniň aşagyndaky mikroskopik dünýä adatdan daşary bozulmalary başdan geçirýär - nuklein kislotalarynyň durnuklylygy, fermentleriň işjeňligi we reagentleriň fiziki ýagdaýy yssy tolkun tarapyndan ýuwaşlyk bilen bozulýar.

Nuklein kislotasyny çykarmak wagt bilen ýaryşa öwrüldi. Daşarky howanyň temperaturasy 40°C-den geçende, hatda kondisioner işleýän bolsa-da, operasiýa stolunyň temperaturasy köplenç 28°C-den ýokary bolýar. Bu wagtda açyk ýerde galan RNK nusgalary ýaz we güýz aýlaryndakydan iki esse çalt zaýalanýar. Magnit munçuklaryny çykarmakda, erijiniň çalt uçujylygy sebäpli bufer ergini ýerli derejede doýgunlaşýar we kristallar aňsatlyk bilen çökýär. Bu kristallar nuklein kislotasyny tutmak netijeliliginde uly üýtgeşikliklere sebäp bolar. Organiki erijileriň uçujylygy bir wagtyň özünde artýar. 30°C-da hloroformyň uçujylygy 25°C-e garanyňda 40% artýar. Iş wagtynda tüsse gapjygyndaky ýeliň tizliginiň 0,5m/s bolmagyny üpjün etmek we gorag netijeliligini saklamak üçin nitril ellikleri ulanmak zerurdyr.

PZR tejribeleri has çylşyrymly temperatura bozulmalary bilen ýüzbe-ýüz bolýar. Taq fermenti we ters transkriptaza ýaly reagentler temperaturanyň birden üýtgemegine örän duýgurdyr. -20°C temperaturadaky doňduryjydan aýrylandan soň turba diwarlaryndaky kondensasiýa reaksiýa ulgamyna girse, ferment işjeňliginiň 15% -den gowrak ýitmegine sebäp bolup biler. dNTP erginleri otagyň temperaturasynda (>30°C) bary-ýogy 5 minutdan soň hem anyklanyp bilinýän dargama görkezip biler. Enjamyň işlemegine ýokary temperatura hem päsgel berýär. Laboratoriýanyň daşky gurşawynyň temperaturasy >35°C we PZR guralynyň ýylylyk ýaýramagy ýeterlik bolmadyk ýagdaýynda (diwardan <50 sm), içki temperatura tapawudy 0,8°C-e çenli ýetip biler. Bu üýtgeşiklik 96 guýulyk plastinkanyň gyrasyndaky güýçlendirme netijeliliginiň 40% -den gowrak peselmegine sebäp bolup biler. Tozan süzgüçlerini yzygiderli arassalamak gerek (tozan toplanmagy ýylylyk ýaýramagy netijeliligini 50% azaldýar) we gönüden-göni kondisionerden gaça durmak gerek. Mundan başga-da, PZR tejribelerini gijesine geçirende, PZR guralyny nusgalary saklamak üçin "wagtlaýyn sowadyjy" hökmünde ulanmakdan gaça durmaly. 4°C-de 2 sagatdan köp saklamak gyzdyrylan gapak ýapylandan soň kondensasiýa emele gelip, reaksiýa ulgamyny suwuklaşdyryp we enjamyň metal modullaryny zaýalap biler.

Ýokary temperatura barada yzygiderli duýduryşlar bilen ýüzbe-ýüz bolan molekulýar laboratoriýalar hem howsala salmalydyrlar. Gymmatly RNK nusgalary -80°C doňduryjynyň arka tarapynda saklanmaly we ýokary temperatura döwürleri bilen çäklendirilmelidir. -20°C doňduryjynyň gapysyny günde bäş gezekden köp açmak temperatura üýtgemelerini güýçlendirer. Ýokary ýylylyk öndürýän enjamlar iki tarapdan we arka tarapdan azyndan 50 sm ýylylyk ýaýratmak üçin giňişlik talap edýär. Mundan başga-da, synag wagtyny täzeden düzmek maslahat berilýär: RNK çykarmak we qPCR ýüklemek ýaly temperatura duýgur amallar üçin irden sagat 7:00-dan 10:00-a çenli; maglumatlary seljermek ýaly synag däl işler üçin 13:00-dan 16:00-a çenli. Bu strategiýa ýokary temperatura pikleriniň möhüm ädimlere päsgel bermeginiň öňüni netijeli alyp biler.

Yssy howa wagtynda molekulýar tejribeler tehnikanyň we sabyrlylygyň synagydyr. Tomusky gün şöhlesiniň aşagynda, belki, pipetkaňyzy goýup, enjamyň has köp ýylylygy çykaryp bilmegi üçin nusgalaryňyza goşmaça buz gutusyny goşmagyň wagty geldi. Temperatura üýtgemelerine bolan bu hormat, tomusky gyzgyn aýlarda iň gymmatly laboratoriýa häsiýetidir - ahyrsoňy, tomusky 40°C yssyda hatda molekulalaryň hem üns bilen goralýan "emeli polýar sebit" gerek.