PCR analizleýji näsazlyklary düzediji: ýygy-ýygydan berilýän soraglar we çözgütler

Polini höwesjeň reaksiýa (PCR) analitikler kliniki anyklaýyş üçin genetiki gözleglerden izolikal gözleglerinden izolýasiýa arzalaryny güýçlendirmäge möhüm ösdürmek üçin möhüm biologika üçin möhüm gurallar. Şeýle-de bolsa, islendik çylşyrymly enjam ýaly PCR analizatory, bu işiňleriniň täsir edýän kynçylyklary ýüze çykyp biler. Bu makalada käbir umumy soraglara ýüzlenýärPCR analizatoryNäsazlyklary düzeltmek we umumy meseleleriň amaly çözgütlerini hödürleýär.

1. Näme üçin PCR reaksiýamyzy güýçlendirmeýär?

Ulanyjylar tarapyndan geçirilen iň köp ýaýran meseleleriň biri, maksadyň depesini güýçlendirmek üçin PCR reaksiýasynyň bolmagydyr. Bu birnäçe faktora degişli bolup biler:

Nädogry primeratiw dizaýnyny anyklaň: prinsatorlaryňyz maksat yzygiderliligi üçin aýratyn bolandygyna göz ýetiriň we iň amatly ereýän temperaturanyň (TM) bardygyna göz ýetiriň. Näçe belgilerden gaça durmazlyk üçin esasy dizaýn üçin programma üpjünçiligini ulanyň.

Şablon dnasy ýok: Sona-da ýeterlik mukdarda şablon dna ulanýandygyňyzy barlaň. Gaty az, gowşak ýa-da ýiti ýok bolar.

Nusgusdaky inhibitorlar: Nusga hapalananlar PCR reaksiýasyny saklap biler. DNK-iňizi arassalaň ýa-da dürli çykaryjy usulyny ulanmak.

Çöziş: Makerim düzümiňizi ýokarlandyrmak, şablon konsentrasiýasyny ýokarlandyrmak we nusganyň kesişip bilmeýändigine göz ýetiriň.

2. Näme üçin PCR önümim nädogry ululykda?

PCR önümiňiz garaşylşy çözülmese, ulanylýan reaksiýa şertleri ýa-da maddalary bilen baglanyşykly meseläni görkezip biler.

Belli däl güýçlendiriş: Maksatly sahypa göz öňünde tutulan sahypada jemlenen bolsa, bu bolup biler. Partlama ýaly gural ulanyp, predomerleriň aýratynlygyny barlaň.

Nädogry Annepaliýa temperaturasy nädogry, adalat temperatura gaty pes, aýratyn baglanyşyk däl bolsa, belli bir baglanyşyk bolup biler. Gradient PCr tarapyndan annehal temperaturany optimizirlemek.

Çözüw: PCR önümleriniň takyklygy ýokarlandyrmak üçin Açýan maglumatlary tassyklaň we assadaniýa temperaturasyny tassyklaň we assadaniýa temperaturasyny gowulandyrmak we Açyk temperatura tassyklamak.

3. PCR analizatorym säwlik habary görkezýär. men näme etmeli?

PCR analizyzy üçin säwlik habarlary aladalandyryp biler, emma köplenç potensial kynçylyklara maslahat berip biler.

Kalibrleme meseleleri: PCR analizatorynyň dogruçyldygyna göz ýetiriň. Takyk netijeleri almak üçin yzygiderli tehniki hyzmat we kalibrleme barlylary möhüm.

Programma üpjünçiligi topary: Käwagtlar, programma üpjünçiliginiň näsazlyklary meselelere sebäp bolup biler. Kompýuteriňizi täzeden açyň we programma üpjünçiligiňizi barlaň.

Çözgüdi: Belli bir säwlik kody üçin ulanyjy gollanmasyna serediň we maslahat berilýän näsazlyklary düzetmek boýunça tabşyryklary ýerine ýetiriň. Yzygiderli tehniki hyzmat köp problemalaryň öňüni alyp biler.

4. Näme üçin PCR reaksiýa netijämlisim gabat gelmeýär?

Gabat gelmeýän PCR netijeleri birnäçe sebäplere görä lapykeç bolup biler:

DÜZGÜN Hilimi: feralynlar, bufers we DNTP-i goşmak bilen ähli ýüklilaryň hemmesi täze we ýokary hilli. Möhleti gutaran ýa-da hapalanan reagenterleriň üýtgemegine sebäp bolup biler.

Malylylyk siksri kalibrlemi: Kompýuteriň temperaturaly temperatura sazlamalary, PCR işine täsir edip biler. Ýylylyk sikriniň kalibrlemligini yzygiderli barlaň.

Çözgüt: yzygiderli netijeleri üpjün etmek üçin ýyldyrym siklleriňizi yzygiderli ulanyň we kalibrläň.

5. PCR reaksiýa netijeliligini nädip ösdürmeli?

PCR reaksiýalarynyň netijeliligini ýokarlandyrmak has ýokary hasyl almaga we has ygtybarly netijelere sebäp bolup biler.

Reaksiýa şertlerini optimizirlemek: Prompalara dürli konsentrasiýalary, şablon depelerini we Mgcl2-iň dürli konsentrasiýalary ulanmak. Her PCR reaksiýasy optimal ýerine ýetirmek üçin özboluşly şertleri talap edip biler.

Giň we ýalanlyk fermentlerini ulanyň: takyklyga, ýalňyşlyk wagtynda ýalňyşlyklary azaltmak üçin has ýokary we ýalňyşlygy ulanmagy göz öňünde tutuň.

Çözüw: A, ýörite PCR gurmak üçin iň oňat şertleri tapmak üçin optimizasiýa synagyny ýerine ýetiriň.

Gysgaça mazmun

Näsazlyklary düzetmek aPCR analizatoryAkyjy iş bolup biler, ýöne umumy meselelere düşünmek we çözmek PCR tejribäňizi ep-esli giňeltmekdir. Bu umumy meseleleri çözmek bilen, gözlegler tejribe, tejribe, tejribe we molekulýar biologiýa yklymlarynda ygtybarly netijeleri ýokarlandyryp we molekulýar biologiýa akymlarynda ygtybarly netijeleri ýokarlandyryp bilerler. Yzygiderli başarnyklary yzygiderli hyzmat etmek, reaksiýa şertlerini optimizirleşdirmek üçin üstünlikli PCR derňewiniň açarydyr.